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William Nicol
Ahora bien, la aportación más importante de Nicol a la ciencia fue el invento del prisma que lleva su nombre para obtener luz polarizada a partir de la luz natural. -
Microscopio de fluorescencia
Hace uso de la fluorescencia y se convierte en una herramienta de inestimable valor para la investigación científica, ya que permite alcanzar altos niveles de sensibilidad y resolución microscópica, permitiendo una apreciación diferente de la información que se puede obtener de los especímenes y que generalmente pasa desapercibida. -
Microscopio de luz polarizada
Comparada con las otras técnicas de incremento de contraste, el uso de la luz polarizada es la más efectiva en el estudio de muestras ricas en materiales birrefringentes, puesto que mejora de manera incomparable la calidad de la imagen. -
Aplicaciones del M. de luz polarizada
• Identificar sustancias cristalinas o fibrosas intracelulares (como el citoesqueleto) y extracelulares (sustancia amiloide, asbesto, colágeno, cristales de uratos y otras de origen exógeno).
• Identificar y estimar cuantitativamente los componentes minerales. -
Microscopio de campo oscuro
El físico Richard Zsigmondy fue quien invento el microscopio de campo oscuro mientras realizaba experimentos en el área de química de coloides. Este aparato también es conocido como ultramicroscopio. -
Características del M. de campo oscuro
-En los microscopios de campo oscuro, aunque se utilicen rayos de luz para su funcionamiento, si observamos por el ocular sin ninguna muestra solo observaremos un círculo negro. Esto se debe a que la luz no encontraría nada que disperse sus haces.
-Los condensadores utilizados son especiales para controlar efectivamente los rayos de luz.
-La visualización brillante de los elementos y partículas en suspensión otorgan un contraste perfecto para su estudio. -
Función del M. de campo oscuro
Es implementado en muestras clínicas para indagar sobre la presencia de Treponema Pallidum y para observar las reconocidas Borrelias y Leptospiras. Permitiendo identificar las características exactas de ellas y su comportamiento. Gracias a esto es posible implementarlo en gran numero de ciencias de la investigación. -
Microscopio de luz ultravioleta
Es un microscopio en el que se usa la luz ultravioleta, que es una radiación cuya longitud de onda es de aproximadamente 200 nm y en consecuencia permite un mayor poder de resolución que la luz visible. -
Aplicaciones del M de luz ultravioleta
• Se emplea en ciencia forense para el análisis de ADN, drogas y estudios de evidencias.
• Estudios biológicos -
Microscopio de interferencia
Fue inventado por Lebedeff quien lo diseño y armó tomando como referencia una descripción y modelo del primer microscopio del 1868 -
Características del M. de interferencia
Posee dos prismas y un condensador el cual se encarga de enfocar los rayos de luz que son emitidas por el foco para que pasen atravesando la muestra. En él se utiliza un sistema de lentes cuya resolución alcanza niveles desde 500 y hasta 1500 dependiendo del modelo. -
Aplicaciones del M. de interferencia
No se debe utilizar para realizar muestras celulares, ni para analizar los tejidos que posean un espesor demasiado ancho. Esto se debe a que los lentes oculares no serian óptimos para ello. Por el contrario, el uso acertado del modelo en específico, es para el análisis de masa seca. -
Microscopio de contraste de fase
Frits Zernike ideó el microscopio de contraste de fase. Permite ver objetos transparentes, o incoloros, que no presentan contraste con la luz. Se utiliza para visualizar células vivas y revelar detalles de su estructura interna. -
Características del M. de contraste de fases
Funciona, como su nombre indica, aumentando el contraste de las fases de las ondas que llegan al objetivo. Esto significa que en este microscopio, el contraste de cada onda depende de su fase. -
Funcionamiento del M. de contraste de fase
Si la luz atraviesa un objeto absorbente, la radiación transmitida se reduce en intensidad. Sin embargo, si atraviesa un medio transparente la intensidad es la misma, pero se provoca una perturbación que ocasiona un retardo en la onda. Este retardo origina una diferencia de fase que el ojo no es capaz de detectar, y tampoco la placa fotográfica. El microscopio de contraste de fase convierte esta diferencia de fase en diferencias de intensidad, que sí son perceptibles para nuestro ojo. -
Sir George Stokes
La fluorescencia es un fenómeno de luminiscencia que fue observado inicialmente por Sir George Stokes en el año 1852, para luego ser explicada físicamente por Alexander Jablonski -
Micrografías de células en división, tomadas con un M. de fluorescencia.
Se emplearon tres fluorocromos: DAPI (emite luz azul) para marcar cromosomas, GFP (proteína verde fluorescente intracelular que emite luz verde) y rodamina (luz roja) para marcar microtúbulos. -
Innovación al modelo de Lebedeff
Smith se atrevió a dar una propuesta de innovación al modelo de Lebedeff colocando dos prismas de Wollaston. Su propuesta de avance en el modelo del microscopio de interferencia permite la observación de las células con una luz polarizada a una mayor resolución. -
Microscopio de contraste por interferencia diferencial
Permite obtener información sobre la densidad óptica de la muestra y observar detalles que de ordinario son invisibles. Los objetos se ven oscuros o claros en un fondo gris, de manera semejante a las imágenes del microscopio de contraste de fases, pero sin halos de difracción. -
Aplicaciones del M. de contraste por interferencia diferencial
•Estudio de células vivas, no coloreadas.
•En el estudio de especímenes un tanto gruesos que no permiten el uso de contraste de fases.
•En tratamientos de fertilización in-vitro. -
Georges Nomarski
Obtuvo otra idea para seguir desarrollando el modelo de Lebedeff. Implementó un sistema especializado que brinda un aumento mayor en la resolución del microscopio permitiendo al ojo humano observar con mayor detalle la muestra de objeto. -
Microscopio Confocal
Marvin Lee Misnky inventó el microscopio confocal de barrido. -
Funcionamiento del M. confocal
Los microscopios confocales captan la luz de todos los planos, pero no toda llega hasta el ojo del investigador. La luz emitida por los planos que está fuera de foco al momento de estudiar una muestra, impide la visualización de la misma de manera específica. Esta luz se elimina con la incorporación “pinhole” o diafragma dentro del microscopio. -
Características del M. confocal
-Equipos complejos y delicados compuestos por partes delicadas.
-El “pinhole” se encuentra ubicado delante del fotomultiplicador, evitando el pasaje de la fluorescencia natural de la muestra.
-El “pinhole” elimina la luz del plano focal.
Se compone de un espejo dicroico y un lente óptico.
-Está soportado en una base tradicional y un ordenador. -
Microscopio de barrido por etapas, de doble enfoque”.
Estudiando el sistema nervioso pensó que si el pudiera verlo en sus diferentes niveles podría entender cómo funcionaban los circuitos neuronales, entonces fue así como desarrolló esta técnica. -
Imagen tridimensional
El microscopio de barrido confocal combina el microscopio de fluorescencia con imagen electrónica y puntos de luz suministrados por láser dirigido al espécimen en particular para obtener imágenes tridimensionales -